Zajímáte se o izolaci, značení nebo vizualizaci exosomů? Zde najdete přehled tří osvědčených přístupů – každý řeší jinou část procesu a můžete je využít samostatně, nebo propojit do uceleného workflow.

_________________________________________________________________________________

ReSyn – izolace EV bez protilátek

Technologie Mag Net™ s MagReSyn® SAX kuličkami umožňuje rychlé a účinné obohacení extracelulárních vezikul (EV), včetně exosomů, přímo z plazmy nebo jiných biofluidů – a to zcela bez použití protilátek. Zachycení EV probíhá díky elektrostatické interakci mezi záporně nabitými fosfolipidy (např. fosfatidylserinem) na membránách vezikul a aniontově-výměnným povrchem SAX kuliček. Díky hyperporézní struktuře navíc dochází k částečné selekci podle velikosti, což pomáhá současně depleovat hojné plazmatické proteiny.

Výsledkem je široké a nezaujaté zachycení EV, které neupřednostňuje žádné konkrétní markery jako CD9, CD63 nebo CD81 – ideální například pro kvantitativní proteomiku. Pro menší objemy (<100 µl) je metoda snadno škálovatelná, a v případě potřeby vyšší propustnosti je k dispozici i Mag Net™ HP Kit 96 (96jamek).

📚  Publikováno v Nature Communications (2025)

🔗 MagReSyn® SAX - Mag Net™ HP Kit 96

📄 Stáhněte si Mag Net protokol (PDF)

_____________________________________________________________________

ABclonal – Protilátky pro značení EV

ABclonal nabízí široký panel validovaných protilátek pro analýzu exosomů. Využít je můžete samostatně pro western blot (WB), ELISA nebo imunofluorescenci (IF).

Nabízené cíle:

  1. Pozitivní markery EV membrány: CD9, CD63, CD81
  2. „Loading“ proteiny: TSG101, ALIX, HSP70, HSPA8, HSP90
  3. Negativní kontrola: Calnexin (marker ER – nemá být přítomen v čistých EV)

📌 Dle MISEV2018 doporučujeme kombinovat několik pozitivních markerů s „loading“ proteinem a negativní kontrolou.

📁 Podrobný přehled všech protilátek včetně aplikací a katalogových čísel si můžete stáhnout jako Excel soubor:

👉 Stáhnout seznam protilátek (.xlsx)

🔗 abclonal.com

📦 Vybrané produkty:

Target Cat.No. Název Aplikace
CD9 A19027 CD9 Rabbit mAb WB, IHC-P, ELISA
CD63 A19023 CD63 Rabbit mAb WB, IHC-P, ELISA
CD81 A5270 CD81 Rabbit pAb WB, IF/ICC, ELISA
TSG101 A5789 TSG101 Rabbit mAb WB, ELISA
ALIX A2215 ALIX Rabbit pAb WB, IF/ICC, ELISA
HSP70 A23457 HSP70 Rabbit mAb WB, IHC-P, IF/ICC
Hsc70 A0415 HSPA8 Rabbit mAb WB, ELISA
HSP90α A26677 KO-validated Hsp90α Rabbit mAb WB, IF/ICC, ELISA
Calnexin A4846 Calnexin Rabbit mAb WB, ELISA

💡 Pro mikroskopii lze využít přímo fluorescenčně značené varianty (např. ABflo® 488/594).

____________________________________________________

Abbelight – vizualizace EV ve skutečném nanoskopickém rozlišení

Abbelight Smart EVs Kit umožňuje zachytit, označit a vizualizovat extracelulární vezikuly (EV) pomocí super-rezoluční mikroskopie SMLM, která dosahuje rozlišení až 10 nm v rovině x–y. Výhodou je možnost kvantifikace jednotlivých částic či klastrů a přesná analýza rozložení specifických markerů.

Smart EVs Kit obsahuje biotinylovaná sklíčka, mikrofluidní komory, reagencie pro zachycení EV pomocí anti CD9/63/81 nebo lektinů (WGA, ConA), dále kontrolní vzorky EV a softwarové řešení NEO pro analýzu klastrů. Připravený formát a optimalizované složení zajišťují vysokou reprodukovatelnost (variabilita mezi replikami < 15 %) a pohodlné nasazení v rutinních experimentech – jedno balení vystačí na ~2 měsíce provozu (5 skel × 6 jamek).

📌 V dokumentaci je výslovně uvedeno doporučení pracovat v souladu s MISEV2018, včetně kalibrace, výpočtu LOD a kontroly pozadí.

🔗 abbelight.com

📄 Stáhněte si brožuru Smart EVs Kit (PDF)

__________________________________________________________________________

Shrnutí: jak si vybrat správný přístup k EV

Každá z uvedených technologií řeší jinou část práce s extracelulárními vezikulami – od izolace přes značení až po pokročilou vizualizaci. Použít je můžete samostatně, nebo je chytře zkombinovat podle zaměření vašeho experimentu.

  • ReSyn (Mag Net™ / SAX)

    Praktická volba pro rychlou a nespecifickou izolaci EV – zachytí široké spektrum vezikul bez nutnosti protilátek, což je ideální např. pro proteomické analýzy.

  • ABclonal

    Spolehlivý panel validovaných protilátek vhodný pro WB, ELISA i IF. Umožňuje cílenou detekci specifických markerů podle doporučení MISEV2018 – včetně pozitivních, „loading“ i negativních kontrol.

  • Abbelight (Smart EVs Kit)

    Pokročilé řešení pro ty, kdo chtějí hluboko pod difrakční limit. Nabízí přesnou kvantifikaci EV a klastrů pomocí SMLM s rozlišením až 10 nm, připravené pro rutinní nasazení ve výzkumu.