Ready-to-use, xeno-free hydrogel system for 3D and 2D neuronal growth, neural stem cell and neuron cultures

Glioblastom patří mezi nejagresivnější nádory centrální nervové soustavy. Pro výzkum jeho progrese, invazivity a terapeutické odpovědi nestačí pouze klasická 2D kultivace. Buňky v ní často ztrácejí část prostorového uspořádání, interakcí s extracelulární matrix a fenotypových vlastností, které jsou pro nádorové chování zásadní.
A právě zde vzniká zásadní problém.
Pro výzkum je potřeba 3D tumoroidní model, který je biologicky relevantní, reprodukovatelný a zároveň použitelný pro delší kultivaci, testování léčiv i automatizované screeningové workflow. Zároveň je výhodné vyhnout se živočišným ECM materiálům, které mohou do experimentů vnášet šaržovou variabilitu a hůře definované složení.
VitroGel® Glioblastoma (GBM) Xeno-Free EMT Kit od TheWell Bioscience je ready-to-use systém pro tvorbu 3D GBM tumoroidů. Podporuje epithelial-to-mesenchymal transition (EMT), dlouhodobou kultivaci tumoroidů a práci s modelem vhodným pro studium progrese nádoru, metastatických mechanismů, invazivity a terapeutické odpovědi.

Produktový set: VitroGel® EMT hydrogel, RocketCell™ GBM Xeno-Free EMT supplement a VitroPrime™ Ultra-Low Attachment U-bottom 96well plate.

Co je součástí kitu

Kit kombinuje syntetický biofunkční hydrogel, definovaný xeno-free supplement a kultivační destičku optimalizovanou pro tvorbu sféroidů/tumoroidů. Cílem je zjednodušit přechod od jednoduchého sféroidu k organizovanějšímu 3D GBM tumoroidnímu modelu.

Proč nestačí běžný 3D model

U 3D nádorových modelů se opakují čtyři praktické výzvy:

• chybějící robustní model EMT pro studium nádorové progrese a metastatických mechanismů,
• obtížná podpora dlouhodobé kultivace tumoroidů,
• omezené možnosti vytvářet komplexní tumoroidní modely z dobře charakterizovaných buněčných linií,
• náročný přechod velkých 3D tumoroidů do automatizace a high-throughput screeningu.

VitroGel® GBM Xeno-Free EMT Kit tyto problémy řeší kombinací definovaného xeno-free hydrogelu, EMT supplementu a U-bottom kultivační destičky pro reprodukovatelnou tvorbu sféroidů a následnou indukci tumoroidního růstu.

Hlavní přínosy pro laboratoř

Xeno-free 3D tumoroidní platforma: Kompletní animal-free systém pro tvorbu 3D GBM tumoroidů s důrazem na šaržovou konzistenci a definovanější experimentální prostředí.

Jednoduchý workflow při pokojové teplotě: Tumoroid lze generovat z jednoduchého sféroidu pomocí protokolu, který nevyžaduje složitou přípravu a je vhodný pro rutinní zavedení v laboratoři. Veškerá příprava probíhá při laboratorní teplotě.

Podpora EMT a dlouhodobé kultivace: Kombinace VitroGel® EMT hydrogelu a RocketCell™ GBM Xeno-Free EMT supplementu podporuje biologicky relevantní epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) a umožňuje udržování organizované struktury tumoroidu po dobu týdnů.

Kompatibilita s automatizací a HTS: Provoz při pokojové teplotě a 96jamkový formát usnadňují přechod do automatizovaných liquid-handling a high-throughput screening workflow.

Workflow: od sféroidu k GBM tumoroidu

Základní princip je jednoduchý: U87-MG buňky se nejprve nasadí do VitroPrime™ Ultra-Low Attachment U-bottom 96well plate, kde přes noc vytvoří sféroid. Následně se přidá směs VitroGel® EMT hydrogelu a RocketCell™ GBM Xeno-Free EMT supplementu, která podporuje přechod k tumoroidnímu růstu a EMT fenotypu. Růst tumoroidu lze sledovat dlouhodobě, včetně viability a odpovědi na chemoterapeutikum temozolomid.

Obr. 1: Vývoj GBM tumoroidu ve VitroGel® EMT hydrogel systému ve srovnání s Matrigelem. U VitroGel® je patrná postupná tvorba většího, strukturovaného tumoroidu během celého 25 denního sledování.

.