Automatizovaná platforma pro zpracování reverzně hybridizačních čipů včetně kroku PCR

Platforma HybriSpot HS12 PCR Auto je IVDR certifikovaný přístroj, který umožňuje plně automatizované zpracování reverzně-hybridizačních čipů firmy Vitro a to včetně PCR, která předchází vlastní reverzní hybridizaci

HybriSpot HS12 PCR Auto, pojme až 12 vzorků během procesu hybridizace a 24 zkumavek PCR během procesu amplifikace. Je vybaven vestavěnou UV lampou, která plně dekontaminuje všechny části zařízení a zajišťuje tak čisté prostředí beze zbytků. Jeho vestavěná kamera snímá obrázky a skenuje čárové kódy činidel, což usnadňuje sledovatelnost a zajišťuje přesné zpracování vzorků.

Hybrispot HS12 PCR Auto je stolní platforma o rozměrech 140 x 52 x 66,2 cm, (rozměr je včetně ovládacího počítače, který je součástí dodávky). Váha vlastního přístroje je 50kg, není tedy nutný jakýkoli stavební zásah do laboratoře, postačí pevný laboratorní stůl a běžná elektrická zásuvka. Přístroj je promýván z vlastní nádoby s promývacím roztokem a disponuje vlastní nádobou, do které odsává odpad. Každá diagnostická souprava (s certifikací CE IVD) obsahuje kompletní sadu reagencií i čipů pro celou metodu. Reagencie jsou umisťovány na boardu přístroje, přičemž jsou připraveny k použití přímo v lahvičkách kompatibilních s příslušnými sloty přístroje, nic není nutné ředit nebo přepipetovávat. Integrovaná kamera odečítá výsledky automaticky. Kapacita přístroje je 1 až 12 čipů (a tomu odpovídající počet pozic v integrovaném PCR cycleru).

PCR probíhá ve stripech s propichovatelnými víčky, proto není nutné s PCR produktem jakkoli uživatelsky manipulovat, přístroj automaticky nanáší PCR produkty na čipy v průběhu procesu reverzní hybridizace. Kompletní čas zpracování včetně všech kroků je cca 180 minut v závislosti na metodě. Po dokončení jsou výsledky na čipech vyhodnoceny automaticky pomocí software HybriSoft a validovány uživatelem. Při validaci je možné v software s výsledky manuálně pracovat, než je vystaven finální report pro každého pacienta

Přístroj rovněž umožňuje oboustrannou komunikaci s LIS.

Po ukončení validace a vydání výsledků je posledním krokem údržba přístroje, kdy je celý přístroj včetně použitých čipů nejprve dekontaminován vestavěnou UV lampou a teprve poté jej uživatel může bezpečně otevřít bez rizika kontaminace laboratorního prostředí potenciálními aerosoly s PCR produkty. Po odebrání reagencií a použitých PCR stripů a čipů je provedeno vnitřní i vnější čištění, které rovněž stroj provádí celé automaticky. Metoda je tak vhodná pro naprosto rutinní laboratorní provozy, kdy celý přístroj může ovládat laborant a validace výsledků může probíhat jako součást finálního uvolnění výsledku do LIS. Ovládací software je velmi uživatelsky příjemný, veškeré ovládání je součástí prvního zaškolení obsluhy během instalace a samozřejmostí je i následná servisní a aplikační podpora, kterou zajišťují naši pracovníci, zaškolení přímo výrobcem platformy i souprav.

Princip Metody

Metoda reverzní hybridizace funguje na principu léty prověřené technologie, která využívá hybridizační princip prob imobilizovaných na membráně. Tyto membrány byly dříve nitrocelulózové, kdy reakce probíhala pouze na povrchu membrány, v soupravách Vitro jsou používány nylonové s lepšími vlastnostmi. U nylonové membrány reakce probíhá v trojrozměrném prostředí, kdy roztok membránou protéká (proto je v názvu soupravy uvedeno „flow chip“), což zajišťuje vyšší specificitu i sensitivitu reakce. Proby ve specifických pozicích jsou při stringentní teplotě (optimalizované pro každou metodu) inkubovány s PCR produktem, který byl při předchozí multiplexové amplifikaci biotinylován. Po jejich specifickém navázání je membrána promyta a signál vizualizován prostřednictvím imunoenzymatické kolorimetrické reakce se streptavidin-alkalickou fosfatázou a chromogenem (NBT-BCIP), která vytváří nerozpustné precipitáty v membráně v těch místech, kde došlo k hybridizaci. Výsledky se analyzují automaticky pomocí softwaru.