Nový standard pro neuronové kultury bez živočišných složek
Ve výzkumu lidského nervového systému dnes stále častěji pracujeme s iPSC-derived neural stem cells (NSC) – tedy neuronálními kmenovými buňkami odvozenými z indukovaných pluripotentních kmenových buněk (iPSC). Tyto iPSC vznikají přeprogramováním běžných somatických buněk zpět do embryonálně podobného stavu a umožňují modelovat lidské neurony bez potřeby embryonální tkáně. NSC odvozené z iPSC jsou tak základem pro vývojové studie, neurodegenerativní modely i screening léčiv.
Xeno-free hydrogel VitroGel® NEURON: Standardizované prostředí pro kultivaci lidských neuronálních buněk nové generace
Pokud pracujete s iPSC-derived NSCs, neuronovými progenitory nebo diferencovanými neurony, jistě znáte komplikace spojené s tradičními matrikami jako je Geltrex a další: potřeba práce při nízkých teplotách, kolísající složení nebo nízká kompatibilita s automatizací.
VitroGel® NEURON tento problém řeší – je to plně definovaný, xeno-free hydrogel, který byl vyvinut speciálně pro 2D i 3D kultivaci neuronálních buněk optimalizovaný i pro dlouhodobé diferenciace.
Proč přejít na VitroGel® NEURON
100% xeno-free, ready-to-use
Plně definované složení, bez nežádoucích živočišných složek. Nepotřebujete lednici ani složitou manipulaci – hydrogel je stabilní při pokojové teplotě a připraven k použití během několika minut.
Vhodný pro 2D a 3D kultivace
Univerzální aplikace pro růst i diferenciaci – včetně tenké 2D vrstvy („thin coating“), „blanket“ pokrytí nebo 3D enkapsulace.
Validováno na iPSC-derived NSC i B35 neuroblastom
Testováno ve studiích – udržuje polarizaci, prodlužuje axonální projekce a umožňuje imunofluorescenční analýzu včetně beta-III-tubulinu.
Srovnatelné či lepší výsledky než Geltrex
Při testování růstu NSC na 2D površích dosáhl VitroGel® NEURON mírně vyšší konfluence než Geltrex, přitom nevyžaduje chlazení ani oplachování.
Jak začít?
Stáhni si protokol
Zajímá tě detailní návod pro kultivaci NSC i neuroblastomů ve 2D a 3D? Kompletní validační data, doporučené protokoly a objemy pro různé formáty najdeš v oficiálním protokolu výrobce.
👉 Stáhni si protokol
Přečti si víc o Xeno free hydrogelech
Zjisti, jak VitroGel platforma mění způsob, jakým se dnes kultivují buňky.
Více informací o xeno-free hydrogelech
Chceš nabídku na míru?
Rádi ti připravíme cenovou nabídku a pomůžeme s návrhem ideální kultivační strategie.
Kontaktuj naši expertku Lenku Šídovou – pomůže ti s výběrem, školením i optimalizací.
@ sidova@svenbiolabs.cz
Data a referenční experimenty k VitroGel® NEURON
2D metoda – tenký povlak pro kultivaci iPSC-NSC, vizualizace protokolu:
VitroGel® NEURON použitý jako tenká 2D vrstva na deskách VitroPrime™ Spread-Attach pro růst NSC odvozených z iPSC:
Obrázek 1: Buňky CD34-eIPSC-NSC byly nasazeny (50 000 buněk na jamku) do 24jamkové desky VitroPrime™ Spread-Attach, předem ošetřené buď VitroGel® NEURON v ředění 1:200, nebo Geltrexem, a kultivovány po dobu 6 dnů se sledováním pomocí systému Incucyte (S3). Snímky byly pořízeny systémem Incucyte; světlá pole byla upravena pomocí funkcí HDR a úrovní ve Photoshopu pro zvýraznění kontrastu buněk.
Výsledek: NSC rostly na VitroGel® NEURON stejně dobře nebo lépe než na Geltrexu, s mírně vyšší konfluencí po 6 dnech.
2D metoda – blanket pokrytí pro diferenciaci B35 buněk, vizualizace protokolu:
2D metoda „blanket“ s využitím hydrogelu VitroGel® NEURON podporuje in vitro neuronální diferenciaci:
Obrázek 2: Imunofluorescenční barvení neuronálních kultur bylo provedeno za účelem detekce markeru beta-III-tubulin, specifického pro neurony, ve dnech 7, 14, 21 a 30 po indukci diferenciace.
- Mikroskopický snímek neuronálních kultur ve světlém poli.
- Zeleně fluorescenční obraz znázorňující přítomnost beta-III-tubulinu.
- Jádra buněk zviditelněna pomocí barvení DAPI (modře).
- Kombinace obrazů B a C.
Kultury byly vizualizovány pomocí systému ImageXpress Nano od Molecular Devices při 20násobném zvětšení.
Výsledek: Výrazná a dlouhodobě udržitelná exprese beta-III-tubulinu, indikující stabilní diferenciaci neuronů.
3D kultivace – diferenciace B35 buněk, vizualizace protokolu:
3D kultivace – diferenciace B35 buněk, vizualizace protokolu:
B35 buňky byly enkapsulovány do hydrogelu (2:1 gel/suspenze) a kultivovány ve 3D po dobu 21 dnů:
Obrázek 3: Imunofluorescenční barvení neuronálních kultur na marker beta-III-tubulin, specifický pro neurony, bylo provedeno ve dnech 7, 14 a 21 po indukci diferenciace.
- Mikroskopický snímek neuronálních kultur ve světlém poli.
- Přítomnost beta-III-tubulinu jako známka pozitivní neuronální diferenciace.
- Barvení jader pomocí DAPI (modře).
- Sloučené obrazy B a C, a v případě dne 14 i A.
Snímky byly pořízeny systémem ImageXpress Nano od společnosti Molecular Devices při 20násobném zvětšení.
Výsledek: Zachování neuronální morfologie, prodloužené axonální projekce a přetrvávající exprese markerů neuronální diferenciace.
Shrnutí klíčových benefitů
|
Vlastnost
|
Výhoda pro laboratoř
|
Stáhni si protokol
Zajímá tě detailní návod pro kultivaci NSC i neuroblastomů ve 2D a 3D? Kompletní validační data, doporučené protokoly a objemy pro různé formáty najdeš v oficiálním protokolu výrobce.
Stáhni si protokol
Přečti si víc o Xeno free hydrogelech
Zjisti, jak VitroGel platforma mění způsob, jakým se dnes kultivují buňky.
Více informací o xeno-free hydrogelech
Chceš nabídku na míru?
Rádi ti připravíme cenovou nabídku a pomůžeme s návrhem ideální kultivační strategie.
Kontaktuj naši expertku Lenku Šídovou – pomůže ti s výběrem, školením i optimalizací.
Kontaktujte nás pro výběr vhodného hydrogelu nebo aplikační podporu
Máte-li zájem o produkty VitroGel®, potřebujete pomoc s výběrem vhodné varianty nebo plánujete přechod ze živočišné matrice, neváhejte se obrátit na naši aplikační specialistku. Poskytujeme technickou i aplikační podporu v českém i anglickém jazyce.
Kontakt:
Mgr. Lenka Šídová
E-mail: sidova@svenbiolabs.cz
- Standardní dodací lhůty: 1–2 pracovní dny ze skladu v ČR.
- Objednávky lze realizovat e-mailem nebo přes e-shop.
- Na vyžádání připravíme nabídku ve formátu PDF.
Podrobné návody a videonávody na použití, senam prověřených linií a řadu dalších materiálů naleznete na stránkách výrobce Well Bioscience
